tag:blogger.com,1999:blog-38875840042748694522024-03-12T17:57:51.038-07:00การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อhttp://www.blogger.com/profile/10114522774018173432noreply@blogger.comBlogger4125tag:blogger.com,1999:blog-3887584004274869452.post-59578315774615306642011-08-03T01:11:00.000-07:002011-08-03T01:11:27.570-07:00<h5 style="mso-layout-grid-align: auto; mso-vertical-align-alt: auto; punctuation-wrap: hanging; text-autospace: ideograph-numeric;"><span lang="TH" style="mso-hansi-font-family: "Angsana New";">วัสดุและอุปกรณ์</span><span style="mso-hansi-font-family: "Angsana New";"></span></h5><div class="MsoNormal" style="margin-left: 36pt;"><span lang="TH">1.<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>วัสดุพันธุ์พืช </span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; text-indent: -24pt;"><span lang="TH">1.1<span style="mso-tab-count: 1;"> </span>หัวย่อย </span>(bulbil) <span lang="TH">ของช่อทับทิม จำนวน </span>2,400<span lang="TH"> หัวย่อย</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l12 level2 lfo1; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">1.2<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">เมล็ดต้อยติ่ง จำนวน 100 เมล็ด</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l12 level2 lfo1; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">1.3<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">เมล็ดดอกดาว จำนวน 200 เมล็ด</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 36pt; text-align: justify;"><span lang="TH">2.<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>วัสดุอุปกรณ์ในการเพาะเลี้ยงหัวย่อยในโรงเรือน</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; text-align: justify; text-indent: -24pt;"><span lang="TH">2.1<span style="mso-tab-count: 1;"> </span>ถาดหลุมโฟมขนาดเส้นผ่านศูนย์กลาง </span>1<span lang="TH"> น ขนาด </span>72<span lang="TH"> หลุมต่อถาด จำนวน </span>34<span lang="TH"><span style="mso-spacerun: yes;"> </span>ถาด</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l11 level2 lfo2; tab-stops: list 95.25pt; text-align: justify; text-indent: -23.25pt;">2.2<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH" style="letter-spacing: -0.2pt;">ถาดหลุมพลาสติกขนาดเส้นผ่านศูนย์กลาง </span><span style="letter-spacing: -0.2pt;">2<span lang="TH"> น ขนาด 24 หลุมต่อถาด จำนวน</span></span><span lang="TH"> </span>100<span lang="TH"> ถาด</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l11 level2 lfo2; tab-stops: list 95.25pt; text-align: justify; text-indent: -23.25pt;">2.3<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">วัสดุปลูก โดยเตรียมจากทรายหยาบ </span>1<span lang="TH"> ส่วน ผสมขุยมะพร้าวร่อน </span>1<span lang="TH"> ส่วน</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l11 level2 lfo2; tab-stops: list 95.25pt; text-align: justify; text-indent: -23.25pt;">2.4<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">วัสดุปลูกในการปลูกครั้งที่สอง โดยเตรียมจากดินร่วน 1 ส่วน ผสมทรายหยาบ 1 ส่วน</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 36pt; text-align: justify;"><span lang="TH">3.<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>วัสดุอุปกรณ์ในการเก็บตัวอย่างพืช</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; text-align: justify; text-indent: 18pt;"><span lang="TH">3.1<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>ขวดแก้วฝาเกลียวปริมาตร </span>5<span lang="TH"> และ 10 มล สำหรับใช้เก็บตัวอย่างราก</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; text-align: justify;"><span lang="TH"><span style="mso-spacerun: yes;"> </span><span style="mso-tab-count: 1;"> </span>3.2<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>กรรไกร</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l6 level2 lfo3; tab-stops: list 95.25pt; text-align: justify; text-indent: -23.25pt;">3.3<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ปากคีบ</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 36pt; text-align: justify;"><span lang="TH">4.<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>วัสดุอุปกรณ์สำหรับศึกษาทางเซลล์พันธุศาสตร์</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; text-align: justify; text-indent: 18pt;"><span lang="TH">4.1<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>เข็มเขี่ย</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; text-align: justify;"><span lang="TH"><span style="mso-spacerun: yes;"> </span><span style="mso-tab-count: 1;"> </span>4.2<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>สไลด์ และแผ่นปิดสไลด์</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; text-align: justify;"><span lang="TH"><span style="mso-spacerun: yes;"> </span><span style="mso-tab-count: 1;"> </span>4.3<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>กล้องจุลทรรศน์พร้อมอุปกรณ์การถ่ายภาพ</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; mso-list: l13 level2 lfo21; tab-stops: list 96.0pt; text-align: justify; text-indent: -24pt;">4.4<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ดินสอที่มีปลายยางลบ สำหรับใช้เคาะแผ่นสไลด์</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; mso-list: l13 level2 lfo21; tab-stops: list 96.0pt; text-align: justify; text-indent: -24pt;">4.5<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">กระดาษซับ</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; mso-list: l13 level2 lfo21; tab-stops: list 96.0pt; text-align: justify; text-indent: -24pt;">4.6<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span>Immersion oil</div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; mso-list: l13 level2 lfo21; tab-stops: list 96.0pt; text-align: justify; text-indent: -24pt;">4.7<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ฟิลม์สี</span></div><h1 style="margin-left: 57pt; mso-list: l17 level1 lfo5; tab-stops: list 57.0pt; text-indent: -21pt;"><span style="font-weight: normal; mso-hansi-font-family: "Angsana New";">5.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span></span><span lang="TH" style="font-weight: normal; mso-hansi-font-family: "Angsana New";">วัสดุอุปกรณ์สำหรับการเพาะเลี้ยงในสภาพปลอดเชื้อ</span><span style="font-weight: normal; mso-hansi-font-family: "Angsana New";"></span></h1><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l17 level2 lfo5; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">5.1<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ตู้กรองอากาศบริสุทธิ์ </span>(air flow cabinet)</div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l17 level2 lfo5; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">5.2<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">เครื่องชั่งไฟฟ้าชนิดละเอียดทศนิยม 4 ตำแหน่ง</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l17 level2 lfo5; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">5.3<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">เครื่องชั่งไฟฟ้าชนิดละเอียดทศนิยม 3 ตำแหน่ง</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l17 level2 lfo5; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">5.4<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">เครื่องวัดความเป็นกรด-ด่าง </span>(pH meter)</div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l17 level2 lfo5; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">5.5<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">เครื่องเขย่า</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l17 level2 lfo5; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">5.6<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">หม้อนึ่งความดันไอ</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l17 level2 lfo5; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">5.7<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">เตาไมโครเวฟ</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l17 level2 lfo5; tab-stops: list 95.25pt; text-align: justify; text-indent: -23.25pt;">5.8<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">เครื่องแก้วอื่นๆ เช่น ปิเปต บีกเกอร์ กระบอกตวง ขวดวัดปริมาตร ขวดใส่สารละลายเข้มข้น ขวดปากกว้างสำหรับเลี้ยงเนื้อเยื่อขนาดเส้นผ่านศูนย์กลาง 75 มม สูง 125 มม และแท่งแก้ว เป็นต้น</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l17 level2 lfo5; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">5.9<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">วัสดุที่ใช้ในตู้กรองอากาศ ได้แก่</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 144pt; mso-list: l17 level3 lfo5; tab-stops: list 144.0pt; text-indent: -36pt;">5.9.1<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ด้ามมีดผ่าตัดเบอร์ 3</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 144pt; mso-list: l17 level3 lfo5; tab-stops: list 144.0pt; text-indent: -36pt;">5.9.2<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ใบมีดผ่าตัด เบอร์ 10 และ 11</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 144pt; mso-list: l17 level3 lfo5; tab-stops: list 144.0pt; text-indent: -36pt;">5.9.3<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ปากคีบทนไฟ ขนาดความยาว 100<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>และ 180 มม</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 144pt; mso-list: l17 level3 lfo5; tab-stops: list 144.0pt; text-indent: -36pt;">5.9.4<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ตะเกียงแอลกอฮอล์</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 144pt; mso-list: l17 level3 lfo5; tab-stops: list 144.0pt; text-indent: -36pt;">5.9.5<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">หลอดทดลองใส่แอลกอฮอล์ขนาด 24</span>x<span lang="TH">150 มม </span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 144pt; mso-list: l17 level3 lfo5; tab-stops: list 144.0pt; text-indent: -36pt;">5.9.6<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">บีกเกอร์ขนาด 50 มม สำหรับวางหลอดทดลองที่ใส่แอลกอฮอล์</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l17 level2 lfo5; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">5.10<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">วัสดุอื่นๆ เช่น แผ่นพลาสติกใส ขนาด 6</span>x<span lang="TH">10 มม ยางรัดของ <span style="letter-spacing: -0.2pt;">แผ่นป้ายกรรมวิธี </span>ฯลฯ</span></div><h1><span lang="TH" style="mso-hansi-font-family: "Angsana New";">สารเคมี</span><span style="mso-hansi-font-family: "Angsana New";"></span></h1><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; mso-list: l15 level1 lfo4; tab-stops: list 54.0pt; text-align: justify; text-indent: -18pt;">1.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">สารเคมีที่ใช้ในการชักนำให้เกิดการเพิ่มโครโมโซม</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l15 level2 lfo4; tab-stops: list 95.25pt; text-align: justify; text-indent: -23.25pt;">1.1<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">โคลชิซีน<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>(</span>Fluka)</div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; mso-list: l15 level1 lfo4; tab-stops: list 54.0pt; text-align: justify; text-indent: -18pt;">2.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">สารเคมีที่ใช้สำหรับศึกษาทางเซลล์พันธุศาสตร์</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l15 level2 lfo4; tab-stops: list 95.25pt; text-align: justify; text-indent: -23.25pt;">2.1<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">สารละลายอิ่มตัว </span>paradiclorobenzene (PDB) <span lang="TH">ใช้เป็น</span> pre-treatment<span style="mso-spacerun: yes;"> </span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; text-align: justify;">solution</div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l15 level2 lfo4; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">2.2<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">น้ำยาตรึงเซลล์ </span>(fixative solution)<span lang="TH"> เพื่อรักษาสภาพ และหยุดการทำงานของ<span style="mso-spacerun: yes;"> </span></span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 72pt;"><span lang="TH"><span style="mso-spacerun: yes;"> </span>เซลล์ประกอบด้วย </span>absolute ethyl alcohol 3<span lang="TH"> ส่วน และ </span>glacial acetic acid </div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 72pt;"><span style="mso-spacerun: yes;"> </span>1<span lang="TH"> ส่วน</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l15 level2 lfo4; tab-stops: list 95.25pt; text-align: justify; text-indent: -23.25pt;">2.3<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span>ethyl alcohol 70 %</div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l15 level2 lfo4; tab-stops: list 95.25pt; text-align: justify; text-indent: -23.25pt;">2.4<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span>hydrocloric acid <span lang="TH">เข้มข้น 1 นอร์มอล </span>(1N HCl)</div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l15 level2 lfo4; tab-stops: list 95.25pt; text-align: justify; text-indent: -23.25pt;">2.5<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span>carbol fuchsin 5 <span lang="TH">และ </span>10 %</div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l15 level2 lfo4; tab-stops: list 95.25pt; text-align: justify; text-indent: -23.25pt;">2.6<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span>aceto orcein 10 %</div><h1 style="margin-left: 54pt; mso-list: l15 level1 lfo4; tab-stops: list 54.0pt; text-indent: -18pt;"><span style="font-weight: normal; mso-hansi-font-family: "Angsana New";">3.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span></span><span lang="TH" style="font-weight: normal; mso-hansi-font-family: "Angsana New";">สารเคมีที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืช</span><span style="font-weight: normal; mso-hansi-font-family: "Angsana New";"></span></h1><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l15 level2 lfo4; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">3.1<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span>ethyl alcohol 70 %</div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l15 level2 lfo4; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">3.2<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">คลอร็อกซ์ (</span>The Clorox Co.,Ltd)</div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l15 level2 lfo4; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">3.3<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">น้ำกลั่น</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l15 level2 lfo4; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">3.4<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">อาหารเหลวสูตร </span>White (1963) <span lang="TH">ดัดแปลง (ตารางผนวก 1)</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l15 level2 lfo4; tab-stops: list 95.25pt; text-indent: -23.25pt;">3.5<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">อาหารวุ้นสูตร </span>MS (1962) <span lang="TH">ดัดแปลง (ตารางผนวก 2)</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 36pt;"><br />
</div><h5 style="mso-layout-grid-align: auto; mso-vertical-align-alt: auto; punctuation-wrap: hanging; text-autospace: ideograph-numeric;"><span lang="TH" style="mso-hansi-font-family: "Angsana New";">วิธีการในการศึกษาครั้งนี้ได้กล่าวถึงรายละเอียดแยกไว้ในแต่ละการทดลอง</span><span style="mso-hansi-font-family: "Angsana New";"></span></h5><div class="MsoNormal"><br />
</div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 72pt; text-indent: -72pt;"><b><span lang="TH">การทดลองที่ </span>1<span style="mso-tab-count: 1;"> </span><span lang="TH">อิทธิพลของสารละลายโคลชิซีนที่ความเข้มข้น และระยะเวลาที่ต่างกันต่อหัวย่อยของช่อทับทิม</span></b><span lang="TH"> </span><b>(<i>Globba rosea </i>Gagnep.)</b></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 72pt; text-indent: -72pt;"><br />
</div><div class="MsoNormal"><b><span lang="TH">วิธีการวิจัย</span></b></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; mso-list: l20 level1 lfo6; tab-stops: list 54.0pt; text-align: justify; text-indent: -18pt;">1.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">วางแผนการทดลองแบบ </span>completely randomized design (CRD) <span lang="TH">ที่มีปัจจัยร่วม 2 ปัจจัยได้แก่ </span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l20 level2 lfo6; tab-stops: list 95.25pt; text-align: justify; text-indent: -23.25pt;">1.1<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ความเข้มข้นของสารละลายโคลชิซีน 6 ระดับคือ 0</span> , 0.015 , 0.03, 0.06, 0.12 <span lang="TH">และ 0.24 </span>% <span lang="TH">(น้ำหนัก</span>/<span lang="TH">ปริมาตร)</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l20 level2 lfo6; tab-stops: list 95.25pt; text-align: justify; text-indent: -23.25pt;">1.2<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">เวลาที่ใช้แช่สารละลาย โคลชิซีน 4 ระดับ คือ 1, 2, 4 และ 6 วัน รวมเป็น 24 กรรมวิธี ๆ ละ 100 หัวย่อย</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; mso-list: l20 level1 lfo6; tab-stops: list 54.0pt; text-align: justify; text-indent: -18pt;">2.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">การเตรียมต้นพืช</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l20 level2 lfo6; tab-stops: list 95.25pt; text-align: justify; text-indent: -23.25pt;">2.1<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">เพาะหัวย่อยในถาดหลุมขนาดเส้นผ่านศูนย์กลาง 1 นิ้ว โดยใช้ทรายหยาบ 1 ส่วน ผสมขุยมะพร้าวร่อน 1 ส่วน เป็นวัสดุเพาะ</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l20 level2 lfo6; tab-stops: list 95.25pt; text-align: justify; text-indent: -23.25pt;">2.2<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ย้ายต้นกล้าที่เพาะได้ปลูกเลี้ยงในถาดหลุมขนาดเส้นผ่านศูนย์กลาง 2 น เพื่อเก็บตัวอย่างรากพืช โดยสุ่มกรรมวิธีละ 20 ต้น</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; mso-list: l20 level1 lfo6; tab-stops: list 54.0pt; text-align: justify; text-indent: -18pt;">3.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH" style="letter-spacing: -0.4pt;">ศึกษาจำนวนโครโมโซมโดยศึกษาจำนวนโครโมโซมปกติของช่อทับทิมจากปลายราก </span>(2n)<span lang="TH"> และ จากละอองเรณู</span> (n) <span lang="TH">ในอับละอองเรณู จากนั้นศึกษาจำนวนโครโมโซมจากปลายรากพืชในชุดทดลอง</span></div><div align="left" class="MsoBodyTextIndent2" style="margin-left: 96pt; text-align: left; text-indent: -24pt;"><span lang="TH">3.1<span style="mso-tab-count: 1;"> </span><span style="letter-spacing: -0.3pt;">การศึกษาจำนวนโครโมโซมจากปลายราก (ใช้วิธีดัดแปลงจากสมหมาย , 2536)</span></span><span style="letter-spacing: -0.3pt;"></span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 126pt; text-align: justify; text-indent: -30.75pt;"><span lang="TH">3.1.1<span style="mso-tab-count: 1;"> </span>เก็บตัวอย่างรากพืชระหว่างเวลา 8.00-11.00 น โดยตัดปลายรากยาว 1 ซม แช่<span style="letter-spacing: -0.1pt;">ในสารละลายอิ่มตัวของ </span></span><span style="letter-spacing: -0.1pt;">PDB<span lang="TH"> ที่อุณหภูมิห้อง นาน 4-6 ชม</span></span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 126pt; text-align: justify; text-indent: -30pt;"><span lang="TH">3.1.2<span style="mso-tab-count: 1;"> </span>นำตัวอย่างที่ได้ไปตรึงเซลล์ </span>(fixation)<span lang="TH"> ด้วยน้ำยาตรึงเซลล์นาน 10-15 นาที</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 126pt; text-align: justify; text-indent: -30pt;"><span lang="TH">3.1.3<span style="mso-tab-count: 1;"> </span>นำไปสลายผนังเซลล์ด้วย<span style="mso-spacerun: yes;"> </span></span>HCl <span lang="TH"><span style="mso-spacerun: yes;"> </span>ที่อุณหภูมิ<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>60 องศาเซลเซีย</span>ส <span lang="TH">นาน 10 นาทีแล้วล้างด้วยน้ำกลั่น 3 ครั้ง</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 126pt; mso-list: l1 level3 lfo22; tab-stops: list 126.0pt; text-align: justify; text-indent: -30pt;">3.1.4<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ย้อมสีปลายรากใน </span><span style="mso-spacerun: yes;"> </span>carbol fuchsin<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>5 % <span style="mso-spacerun: yes;"> </span>นาน 1 <span lang="TH">คืน ก่อนนำมา <span style="mso-spacerun: yes;"> </span></span>squash<span lang="TH"> บนสไลด์เพื่อตรวจนับจำนวนโครโมโซม ในระยะเมตาเฟสด้วยกล้องจุลทรรศน์กำลังขยาย 1,000 เท่า</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; text-align: justify; text-indent: -24pt;"><span lang="TH">3.2<span style="mso-tab-count: 1;"> </span>การศึกษาจำนวนโครโมโซมจากละอองเรณู</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 126pt; mso-list: l9 level3 lfo23; tab-stops: list 126.0pt; text-align: justify; text-indent: -30pt;">3.2.1<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">เขี่ยอับละอองเรณูที่อ่อน ขยี้ให้แตกบนกระจกสไลด์ แล้วหยดสี </span>aceto orcein 10 % <span lang="TH">และ </span>carbol fuchsin 10 % <span lang="TH">ปิดด้วยแผ่นปิดสไลด์</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 126pt; mso-list: l9 level3 lfo23; tab-stops: list 126.0pt; text-align: justify; text-indent: -30pt;">3.2.2<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ตรวจนับจำนวนโครโมโซม ในระยะเมตาเฟส ด้วยกล้องจุลทรรศน์กำลังขยาย 1,000 เท่า </span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; text-align: justify;"><br />
</div><h2 style="margin-left: 0cm;"><span lang="TH" style="font-size: 16pt;">การบันทึกข้อมูล</span><span style="font-size: 16pt;"></span></h2><div class="MsoNormal"><span lang="TH"><span style="mso-tab-count: 1;"> </span>บันทึกการงอก และการเจริญของต้น ดังนี้</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l21 level1 lfo7; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">1.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">อัตราการงอกของหัวย่อย</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l21 level1 lfo7; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">2.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ระยะเวลาที่ใช้ในการงอก</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l21 level1 lfo7; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">3.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">อัตราความอยู่รอดของหัวใหม่</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l21 level1 lfo7; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">4.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ระยะเวลาที่ใช้ในการออกดอก</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l21 level1 lfo7; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">5.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ศึกษาจำนวนโครโมโซมจากรากของหัวย่อย และหัวใหม่อย่างน้อย 10 เซลล์ต่อต้น</span></div><div class="MsoNormal"><br />
</div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 72pt; text-indent: -72pt;"><b><span lang="TH">การทดลองที่ </span>2<span style="mso-tab-count: 1;"> </span><span lang="TH">อิทธิพลของสารละลายโคลชิซีนที่ความเข้มข้น และระยะเวลาที่ต่างกันต่อเมล็ดของต้อยติ่ง </span>(<i>Ruellia tuberosa </i>Linn.)</b></div><div class="MsoNormal"><span lang="TH"><span style="mso-tab-count: 1;"> </span></span></div><h5 style="mso-layout-grid-align: auto; mso-vertical-align-alt: auto; punctuation-wrap: hanging; text-autospace: ideograph-numeric;"><span lang="TH" style="mso-hansi-font-family: "Angsana New";">วิธีการวิจัย</span><span style="mso-hansi-font-family: "Angsana New";"></span></h5><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; mso-list: l0 level1 lfo9; tab-stops: list 54.0pt; text-align: justify; text-indent: -18pt;">1.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">วางแผนการทดลองแบบ </span><span style="mso-spacerun: yes;"> </span>completely<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>randomized<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>design<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>(CRD) <span lang="TH"><span style="mso-spacerun: yes;"> </span>ที่มีปัจจัยร่วม<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>2<span style="mso-spacerun: yes;"> </span></span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; text-align: justify;"><span lang="TH">ปัจจัยได้แก่ </span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 95.25pt; mso-list: l10 level2 lfo10; tab-stops: list 95.25pt; text-align: justify; text-indent: -23.25pt;">1.1<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ความเข้มข้นของสารละลายโคลชิซีน 5 ระดับคือ 0</span><span style="mso-spacerun: yes;"> </span>, 0.025<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>, 0.05<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>, 0.10<span style="mso-spacerun: yes;"> </span><span lang="TH">และ 0.20 </span><span style="mso-spacerun: yes;"> </span>% <span lang="TH">(น้ำหนัก</span>/<span lang="TH">ปริมาตร)</span></div><div class="MsoBodyTextIndent3"><span lang="TH">1.2<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>เวลาที่ใช้แช่สารละลาย โคลชิซีน 2 ระดับคือ 1 และ 2 วัน รวมเป็น 10 กรรมวิธี ๆ ละ 10 เมล็ด</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; tab-stops: 54.0pt; text-align: justify;"><span lang="TH">แต่ละกรรมวิธีใช้สารละลายโคลชิซีนในอาหารเหลวสูตร</span><span lang="TH" style="mso-ansi-language: TH;"> </span><span lang="TH"><span style="mso-spacerun: yes;"> </span></span>White (1963) <span lang="TH">ดัดแปลง (วิธีการเตรียมสารละลายโคลชิซีนในอาหารเหลว แสดงในตารางผนวก 3)</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; mso-list: l0 level1 lfo9; tab-stops: list 54.0pt; text-align: justify; text-indent: -18pt;">2.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">การเตรียมตัวอย่างพืช</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; mso-list: l7 level2 lfo13; tab-stops: list 96.0pt; text-align: justify; text-indent: -24pt;">2.1<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">นำฝักของต้อยติ่งมาทำความสะอาดและฆ่าเชื้อที่ผิว<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>โดยนำไปจุ่มใน </span><span style="mso-spacerun: yes;"> </span>ethyl </div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; text-align: justify; text-indent: 7.5pt;">alcohol 70 % <span lang="TH">นำไปแกะฝักในตู้กรองอากาศบริสุทธิ์<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>แล้วจึงนำเมล็ดที่ได้ไป</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; text-align: justify; text-indent: 1.5pt;"><span lang="TH">แช่ในสารละลายโคลชิซีนที่เติมลงในอาหารเหลวสูตร </span>White (1963)<span lang="TH"> ดัดแปลงที่ความเข้มข้น และระยะเวลาต่างๆ</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; mso-list: l7 level2 lfo13; tab-stops: list 96.0pt; text-align: justify; text-indent: -24pt;">2.2<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">นำเมล็ดที่ผ่านการให้โคลชิซีนที่ความเข้มข้น และเวลาต่างกัน ไปเลี้ยงบนอาหารวุ้นสูตร </span>White <span lang="TH">(1963)<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>ดัดแปลง</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; mso-list: l7 level2 lfo13; tab-stops: list 96.0pt; text-align: justify; text-indent: -24pt;"><span style="letter-spacing: -0.4pt;">2.3<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span></span><span lang="TH" style="letter-spacing: -0.4pt;">ตัดย้ายส่วนเหนือใบเลี้ยง แล้วนำไปเลี้ยงต่อบนอาหารวุ้นสูตร </span><span style="letter-spacing: -0.4pt;">MS (1962) <span lang="TH">ดัดแปลง นำปลายรากที่เกิดขึ้นไปตรวจหาจำนวนโครโมโซมที่อาจเปลี่ยนแปลงจากการทดลอง</span></span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; mso-list: l7 level2 lfo13; tab-stops: list 96.0pt; text-align: justify; text-indent: -24pt;">2.4<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH" style="letter-spacing: -0.1pt;">ตัดย้ายยอดของต้นที่เก็บรากครั้งที่ 1<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>แล้วนำไปเลี้ยงต่อบนอาหารวุ้นสูตร </span><span style="letter-spacing: -0.1pt;">MS</span><span style="letter-spacing: -0.1pt; mso-ansi-language: TH;"> </span><span style="letter-spacing: -0.1pt;">(1962) <span lang="TH"><span style="mso-spacerun: yes;"> </span>ดัดแปลง<span style="mso-spacerun: yes;"> </span></span></span><span lang="TH" style="letter-spacing: -0.4pt;">นำปลายรากที่เกิดขึ้นไปตรวจหาจำนวนโครโมโซมที่อาจเปลี่ยนแปลงจากการเจริญของยอด</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; mso-list: l0 level1 lfo9; tab-stops: list 54.0pt; text-align: justify; text-indent: -18pt;">3.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">การศึกษาจำนวนโครโมโซม</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 72pt; text-align: justify;"><span lang="TH">ตามกรรมวิธีของการทดลองที่ 1</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 72pt; text-align: justify;"><br />
</div><h2 style="margin-left: 0cm;"><span lang="TH" style="font-size: 16pt;">การบันทึกข้อมูล</span><span style="font-size: 16pt;"></span></h2><div class="MsoNormal"><span lang="TH"><span style="mso-tab-count: 1;"> </span>บันทึกการงอก และการเจริญของต้น ดังนี้</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l18 level1 lfo16; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">1.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">จำนวนวันเมื่อเริ่มงอกของเมล็ด</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l18 level1 lfo16; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">2.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ระยะเวลาที่ใช้ในการงอกสูงสุด</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l18 level1 lfo16; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">3.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ระยะเวลาที่ใช้ในการแตกยอดใหม่</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l18 level1 lfo16; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">4.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">การเจริญของยอดใหม่</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l18 level1 lfo16; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">5.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ระยะเวลาที่ใช้ในการออกรากของยอดใหม่</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l18 level1 lfo16; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">6.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">คุณภาพของยอด</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l18 level1 lfo16; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">7.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ศึกษาจำนวนโครโมโซมจากปลายราก อย่างน้อย 10 เซลล์ต่อต้น</span></div><div class="MsoNormal"><br />
</div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 72pt; text-indent: -72pt;"><b><span lang="TH">การทดลองที่ </span>3<span style="mso-tab-count: 1;"> </span><span lang="TH">อิทธิพลของสารละลายโคลชิซีนที่ความเข้มข้น และระยะเวลาที่ต่างกันต่อเมล็ดของดอกดาว </span>(<i>Ipomoea quamoclit </i>Linn.)</b></div><div class="MsoNormal"><br />
</div><h5 style="mso-layout-grid-align: auto; mso-vertical-align-alt: auto; punctuation-wrap: hanging; text-autospace: ideograph-numeric;"><span lang="TH" style="mso-hansi-font-family: "Angsana New";">วิธีการวิจัย</span><span style="mso-hansi-font-family: "Angsana New";"></span></h5><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; mso-list: l19 level1 lfo17; tab-stops: list 54.0pt; text-align: justify; text-indent: -18pt;">1.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">วางแผนการทดลองแบบ </span>completely randomized design (CRD) <span lang="TH">ที่มีปัจจัยร่วม 2 ปัจจัยได้แก่ </span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; mso-list: l19 level2 lfo17; tab-stops: list 96.0pt; text-align: justify; text-indent: -24pt;">1.1<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ความเข้มข้นของสารละลายโคลชิซีน 5 ระดับคือ 0</span>, 0.05, 0.10, 0.15 <span lang="TH">และ 0.20 </span><span style="mso-spacerun: yes;"> </span>% <span lang="TH">(น้ำหนัก</span>/<span lang="TH">ปริมาตร)</span></div><div class="MsoBodyTextIndent3"><span lang="TH">1.2<span style="mso-tab-count: 1;"> </span>เวลาที่ใช้แช่สารละลาย โคลชิซีน 2 ระดับคือ 1 และ 2 วัน รวมเป็น 10 กรรมวิธี ๆ ละ 20 เมล็ด</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; tab-stops: 54.0pt; text-align: justify;"><span lang="TH">แต่ละกรรมวิธีใช้สารละลายโคลชิซีนในอาหารเหลวสูตร</span><span lang="TH" style="mso-ansi-language: TH;"> </span><span lang="TH"><span style="mso-spacerun: yes;"> </span></span>White (1963) <span lang="TH">ดัดแปลง (วิธีการเตรียมสารละลายโคลชิซีนในอาหารเหลว แสดงในตารางผนวก 3)</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; mso-list: l19 level1 lfo17; tab-stops: list 54.0pt; text-align: justify; text-indent: -18pt;">2.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">การเตรียมตัวอย่างพืช</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; mso-list: l19 level2 lfo17; tab-stops: list 96.0pt; text-align: justify; text-indent: -24pt;">2.1<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">นำเมล็ดดอกดาวไปฆ่าเชื้อที่ผิว โดยนำไปแช่ในสารละลายคลอรอกซ์ 15</span> %<span lang="TH"> (โดยปริมาตร) ล้างด้วยน้ำกลั่น 3 ครั้ง แล้วจึงนำเมล็ดที่ได้ไปแช่ในสารละลายโคลชิซีนในอาหารเหลวสูตร </span>White (1963)<span lang="TH"> ดัดแปลงที่ความเข้มข้น และระยะเวลาต่างๆ นำเมล็ดที่ผ่านการให้โคลชิซีนที่ความเข้มข้น และระยะเวลาต่างๆ ไปเลี้ยงบนอาหารวุ้นสูตร </span>White <span lang="TH">(1963)<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>ดัดแปลง</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; tab-stops: list 96.0pt; text-align: justify; text-indent: -24pt;"><span lang="TH" style="letter-spacing: -0.4pt;">2.2<span style="mso-tab-count: 1;"> </span>ตัดย้ายส่วนเหนือใบเลี้ยง แล้วนำไปเลี้ยงต่อบนอาหารวุ้นสูตร </span><span style="letter-spacing: -0.4pt;">MS <span lang="TH">(1962) ดัดแปลง นำปลายรากที่เกิดขึ้นไปตรวจหาจำนวนโครโมโซมที่อาจเปลี่ยนแปลงจากการทดลอง</span></span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 96pt; tab-stops: list 96.0pt; text-align: justify; text-indent: -24pt;"><span lang="TH" style="letter-spacing: -0.1pt;">2.3<span style="mso-tab-count: 1;"> </span>ตัดย้ายยอดของต้นที่เก็บรากครั้งที่ 1<span style="mso-spacerun: yes;"> </span>แล้วนำไปเลี้ยงต่อบนอาหารวุ้นสูตร </span><span style="letter-spacing: -0.1pt;">MS</span><span style="letter-spacing: -0.1pt; mso-ansi-language: TH;"> </span><span lang="TH" style="letter-spacing: -0.1pt;">(1962)</span><span style="letter-spacing: -0.1pt;"> <span lang="TH">ดัดแปลง </span></span><span lang="TH" style="letter-spacing: -0.4pt;">นำปลายรากที่เกิดขึ้นไปตรวจหาจำนวนโครโมโซมที่อาจเปลี่ยนแปลงจากการเจริญของยอด</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 54pt; mso-list: l19 level1 lfo17; tab-stops: list 54.0pt; text-align: justify; text-indent: -18pt;">3.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">การศึกษาจำนวนโครโมโซม</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 72pt; text-align: justify;"><span lang="TH">ตามกรรมวิธีของการทดลองที่ 1</span></div><div class="MsoNormal"><br />
</div><h2 style="margin-left: 0cm;"><span lang="TH" style="font-size: 16pt;">การบันทึกข้อมูล</span><span style="font-size: 16pt;"></span></h2><div class="MsoNormal"><span lang="TH"><span style="mso-tab-count: 1;"> </span>บันทึกการงอก และการเจริญของต้น ดังนี้</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l8 level1 lfo18; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">1.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">จำนวนวันเมื่อเริ่มงอกของเมล็ด</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l8 level1 lfo18; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">2.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ระยะเวลาที่ใช้ในการงอกสูงสุด</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l8 level1 lfo18; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">3.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ระยะเวลาที่ใช้ในการแตกยอดใหม่</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l8 level1 lfo18; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">4.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">การเจริญของยอดใหม่</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l8 level1 lfo18; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">5.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ระยะเวลาที่ใช้ในการออกรากของยอดใหม่</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l8 level1 lfo18; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">6.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">คุณภาพของยอด</span></div><div class="MsoNormal" style="margin-left: 90pt; mso-list: l8 level1 lfo18; tab-stops: list 90.0pt; text-indent: -18pt;">7.<span style="font: 7pt "Times New Roman";"> </span><span lang="TH">ศึกษาจำนวนโครโมโซมจากปลายราก อย่างน้อย 10 เซลล์ต่อต้น<img height="142" id="il_fi" src="http://www.rspg.or.th/experimental_project/pics/olive01.jpg" style="padding-bottom: 8px; padding-right: 8px; padding-top: 8px;" width="189" /></span></div>การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อhttp://www.blogger.com/profile/10114522774018173432noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-3887584004274869452.post-71533851239193438222011-08-03T01:03:00.000-07:002011-08-03T01:03:08.568-07:00กุหลาบ ถือได้ว่าเป็นราชินีของดอกไม้ที่นิยมปลูกกันทั่วไป มีมากมายหลายสี หลากพันธุ์ รวมถึงกุหลาบจิ๋วหรือเบบี้โรสที่เป็นที่นิยมปลูกเช่นกัน ซึ่งที่ศูนย์ขยายพันธุ์พืชสยาม (Siam Plant Propagation Center) ตั้งอยู่เลขที่ 189 หมู่ที่ 4 ตำบลเหมืองแก้ว อำเภอแม่ริม จังหวัดเชียงใหม่ โดย คุณวรนัฐ เสนีวงศ์ ณ อยุธยา และ ดร. วรรณา สนั่นพานิชกุล สองสามีภรรยา เจ้าของศูนย์ ได้ขยายพันธุ์กุหลาบด้วยการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อมากถึง 15 สี จาก 15 สายพันธุ์<br />
<br />
คุณวรนัฐ กล่าวว่า การเพาะเนื้อเยื่อพืช (Plant tissue culture) ในปี พ.ศ. 1902 นักวิทยาศาสตร์ชื่อ Haerldt คิดว่าเนื้อเยื่อพืชน่าจะนำมาเลี้ยงให้มีชีวิตและเจริญเติบโตได้ การทดลองค้นคว้าเกี่ยวกับการเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชจึงได้เริ่มขึ้นนับตั้งแต่นั้นมา การทดลองค้นคว้าส่วนใหญ่ในระยะแรกๆ ความสำเร็จจำกัดอยู่ตรงที่ทำให้เนื้อเยื่อพืชมีชีวิตรอดอยู่ได้ในอาหารเทียม ต่อมาได้มีการค้นพบสูตรอาหารเทียมที่สมบูรณ์ เหมาะสมที่จะเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ซึ่งในสมัยนั้น เรียกว่า Whites medium ทำให้ความสำเร็จในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชขยายวงกว้างขึ้น จนสามารถพัฒนาเป็นต้นพืชที่สมบูรณ์และนำออกปลูกได้ในที่สุด<br />
<br />
การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชในประเทศไทยประสบความสำเร็จมาก ในเรื่องการขยายพันธุ์กล้วยไม้ ซึ่งเริ่มต้นมาเมื่อประมาณ 30-40 ปี ที่ผ่านมา จนปัจจุบันประเทศไทยมีบุคลากรในเรื่องเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชมากมาย และมีพืชหลากหลายชนิดที่ขยายพันธุ์โดยวิธีการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่ออย่างแพร่หลาย เช่น กล้วยหอมทอง สตรอเบอรี่ สับปะรด มันฝรั่ง เบญจมาศ เยอร์บีร่า กล้วยไม้ ยูคาลิปตัส มะละกอ ไผ่ เป็นต้น<br />
<br />
คุณวรนัฐ บอกด้วยว่า จากการศึกษาด้านการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ทำให้ตนและภรรยาผันชีวิตจากการทำงานราชการมาเปิดศูนย์ขยายพันธุ์สยามเพื่อเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ เริ่มจากการเพาะพันธุ์กล้วยน้ำว้า ต่อมาได้เพาะกุหลาบจิ๋วด้วย โดยวิธีการเพาะเนื้อเยื่อเริ่มต้นจากการนำเอากิ่งกุหลาบจากพันธุ์ปกติที่ต้องการปลูก 15 สายพันธุ์ มาตัดเป็นกิ่งเล็กๆ จากนั้นนำมาปักเลี้ยงลงบนวุ้นอาหารภายในขวดเพาะเลี้ยงประมาณ 12-15 เดือน กิ่งที่เลี้ยงไว้จะเติบโตและงอกออกมาเป็นต้นเล็กๆ นำไปเข้าห้องแล็บ อนุบาลต่อในขวดจนได้กุหลาบที่แข็งแรง จึงนำมาแยกต้นเลี้ยงให้โตโดยปลูกในกระถางเล็ก ขนาด 3 นิ้ว ปลูกได้ประมาณ 20 วัน เริ่มออกดอกชุดแรก หลังจากที่ชุดแรกร่วงจะตัดแต่งกิ่งออก ต่อจากนั้นอีกประมาณ 15-20 วัน ต้นกุหลาบจิ๋วเริ่มแตกกิ่งใหม่อีก 7-8 กิ่ง ผ่านไป 2-2 เดือนครึ่ง ก็ออกดอก<br />
<br />
จุดเด่นของกุหลาบจิ๋วมีพุ่มเตี้ยแต่ออกดอกดก ดอกให้กลิ่นหอมอ่อนๆ ส่วนการดูแล รดน้ำให้ชุ่ม วันละ 1-2 ครั้ง หลังพระอาทิตย์ขึ้น หรือก่อนพระอาทิตย์ตกดิน 1-2 ชั่วโมง การให้ปุ๋ยใช้ตามความเหมาะสม อาจใช้ปุ๋ยสูตร 25-7-7 ละลายน้ำ 1 ช้อนชา ต่อน้ำ 10 ลิตร ทุกๆ 10-15 วัน ในช่วงพัฒนาพุ่ม ช่วงเกิดดอกอาจใช้ปุ๋ยสูตร 15-15-15 หรือสูตรที่มี P และ K สูงกว่า N รดแบบเดียวกัน การแต่งกิ่ง ให้หมั่นแต่งกิ่ง มีอายุยืนอยู่ได้มากกว่า 1 ปี ส่วนราคากระถางละ 29 บาท<br />
<br />
ด้าน ดร. วรรณา กล่าวว่า นอกจากทางศูนย์จะเพาะเนื้อเยื่อกล้วย กุหลาบจิ๋ว ยังมีการเพาะเนื้อเยื่อหน่อไม้ฝรั่ง เป็นพันธุ์ที่คิดโดยเกษตรกรหรือกลุ่มเกษตรกรผู้ปลูกหน่อไม้ฝรั่งในเขตภาคตะวันตก (นครปฐม และราชบุรี) มีคุณลักษณะเจริญเติบโตรวดเร็ว ให้ผลผลิตตามมาตรฐานส่งต่างประเทศ มีหน่อตกเกรดน้อย ขณะนี้มีหน่วยงานภาครัฐ เอกชน และเกษตรกรเริ่มให้ความสนใจ สั่งจองต้นพันธุ์มากพอสมควร<br />
<br />
หน่อไม้ฝรั่ง เป็นพืชผักอายุยืน เก็บผลผลิตได้ต่อเนื่องนานนับสิบปีโดยไม่ต้องปลูกใหม่แบบผักล้มลุกทั่วไป ตลาดส่งออกต่างประเทศมีความต้องการหน่อไม้ฝรั่งจากประเทศไทยมาก (ญี่ปุ่น ไต้หวัน) ดังนั้น ผลผลิตที่ผลิตได้ส่วนใหญ่ 70-80 เปอร์เซ็นต์ ที่จังหวัดราชบุรี กาญจนบุรี นครปฐม สุพรรณบุรี ปราจีนบุรี ฯลฯ มากกว่า 30,000 ไร่ ส่งออกต่างประเทศ คนไทยจึงไม่ค่อยมีโอกาสบริโภคหน่อไม้ฝรั่งมากนัก ทั้งที่เป็นผู้ผลิตรายสำคัญ<br />
<br />
พันธุ์หน่อไม้ฝรั่งเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ มีคุณสมบัติดีคือ ให้ผลผลิตสม่ำเสมอเป็นมาตรฐานเดียวกัน แตกต่างจากการขยายพันธุ์ด้วยเมล็ดที่ให้ผลผลิตไม่สม่ำเสมอ เกษตรกรผู้ปลูกในเขตภาคตะวันตกของประเทศไทยให้ความสนใจต้นพันธุ์หน่อไม้ฝรั่งจากการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเพื่อทดแทนต้นพันธุ์ที่ขยายมาจากเมล็ดในขณะนี้<br />
<br />
การขยายพันธุ์กล้วยน้ำว้าเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ เป็นกล้วยน้ำว้าสายพันธุ์ อำเภอท่ายาง จังหวัดเพชรบุรี มีคุณสมบัติให้ผลผลิตสูง 8-12 หวี ต่อเครือ เปลือกหนา เมื่อสุกเนื้อไม่นิ่ม ไม่ติดเมล็ด มีลักษณะผลโต สีเหลืองนวล รสชาติอร่อย ตรงตามคุณสมบัติกล้วยน้ำว้าท่ายางทุกประการ<br />
<br />
ส่วนต้นกันยุงที่เพาะด้วยเนื้อเยื่อ มีลักษณะ ใบมีกลิ่นของน้ำมันหอมระเหยคล้ายน้ำมันหอมระเหยจากตะไคร้หอม ในต่างประเทศ เช่น ออสเตรเลีย นิยมปลูกไว้ตามบริเวณบ้านเพื่อให้ใบสิ่งกลิ่นหอมอ่อนๆ ที่ยุงไม่ชอบ จึงมีผู้ตั้งชื่อเป็นภาษาไทยว่า ต้นกันยุง<img src="http://www.bloggang.com/data/e/endless9/picture/1252594232.jpg" />การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อhttp://www.blogger.com/profile/10114522774018173432noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-3887584004274869452.post-57112570272510215372011-08-03T00:58:00.001-07:002011-08-03T00:58:39.596-07:00<center><img alt="ประโยชน์ของการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ" src="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/pt_20.gif" /></center><img align="left" hspace="10" src="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/pt147.gif" vspace="10" /><br />
๑. การ<wbr>ขยาย<wbr>พันธุ์<wbr>พืช (Micropropagation) การ<wbr>นำ<wbr>เทคโนโลยี<wbr>ของ<wbr>การ<wbr>เพาะ<wbr>เลี้ยง<wbr>เนื้อ<wbr>เยื่อ<wbr>พืช<wbr>ไป<wbr>ใช้<wbr>ประ<wbr>โยชน์<wbr> ทางด้าน<wbr>การ<wbr>ขยาย<wbr>พันธุ์<wbr>พืช<wbr>ให้<wbr>ได้<wbr>ต้น<wbr>ปลอด<wbr>โรค<wbr>เป็นจำนวน<wbr>มาก<wbr>อย่างรวดเร็ว<wbr> (rapid asexual propagation) สามารถ<wbr>ผลิต<wbr>ต้น<wbr>พันธุ์<wbr>ได้<wbr>ตลอด<wbr>ปี ซึ่ง<wbr>เมื่อ<wbr>นำ<wbr>ไป<wbr>ปลูก จะ<wbr>ได้<wbr>ต้น<wbr>ลักษณะ<wbr>เหมือนเดิมทุก<wbr>ประการ และ<wbr>ให้<wbr>ผล<wbr>ผลิต<wbr>ที่<wbr>มี<wbr>คุณภาพ <wbr>ดี การ<wbr>ขยาย<wbr>พันธุ์<wbr>พืช<wbr>โดย<wbr>การ<wbr>เพาะ<wbr>เลี้ยง<wbr>เนื้อ<wbr>เยื่อ<wbr>นี้ปกติ<wbr>จะ<wbr>ผลิต<wbr>ต้น<wbr>พันธุ์<wbr>ขนาด<wbr>เล็ก (miniplant หรือ plantlet) ได้<wbr>แก่ กล้วย<wbr>ไม้ <a href="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/nk1p8k14.htm">เบญจมาศ<wbr><wbr></a> ขิง สับ<wbr>ปะ<wbr>รด กล้วย หรือ<wbr>ผลิต<wbr>ใน<wbr>รูป<wbr>ของ<wbr>หัว<wbr>พันธุ์<wbr>ขนาด<wbr>เล็ก (microtuber หรือ bulbler หรือ cormel) ได้<wbr>แก่<wbr><wbr><a href="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/nk1p8k29.htm"> มัน<wbr>ฝรั่ง<wbr><wbr></a> <a href="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/nk1p8k26.htm">ลิลลี่<wbr><wbr></a> <a href="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/nk1p8k11.htm">แกลดิโอลัส<wbr></a> หรือ<wbr>ผลิต<wbr>เมล็ด<wbr>พันธุ์<wbr>พืช<wbr>ต่าง ๆ โดย<wbr>วิธีบังคับ<wbr>ให้<wbr>เกิด<wbr>โซ<wbr>มา<wbr>ติกเอมบริ<wbr>โอ หรือ<wbr>เอมบริ<wbr>ออยด์ (somatic embryo หรือ embryoid) ได้<wbr>แก่ <a href="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/nk1p8k28.htm">แค<wbr>รอท<wbr></a> มะละกอ กาแฟ หน่อ<wbr>ไม้<wbr>ฝรั่ง และ<wbr>ถ้า<wbr>เคลือบ<wbr>ด้วย<wbr>สาร<wbr>เคมี<wbr>บาง<wbr>ชนิด เช่น โซเดียม<wbr>แอลจิเนต (sodiumalginate) ทำ<wbr>เป็น<wbr>เปลือก<wbr>เมล็ด (seed coat) ก็<wbr>จะ<wbr>ได้<wbr>เป็น<wbr>เมล็ด<wbr>เทียม (artificial seed) สามารถ<wbr>เก็บ<wbr>รักษา และ<wbr>ขน<wbr>ส่ง<wbr>ได้<wbr>สะดวก<wbr>กว่า<wbr>วิธี<wbr>ผลิต<wbr>ต้น<wbr>โดย<wbr>ตรง <img align="left" hspace="10" src="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/pt146.gif" vspace="10" /><br />
๒. การ<wbr>อนุรักษ์<wbr>เชื้อ<wbr>พันธุ์<wbr>พืช (Germplasm conservation, gene bank) <wbr>เป็น<wbr>การ<wbr>เก็บ<wbr>รักษา<wbr>พันธุ์<wbr>พืช คือ เก็บ<wbr>แคลลัสของ<wbr>พืช<wbr>ที่<wbr>อุณหภูมิ -196 องศา<wbr>เซลเซียส (cryopreservation) ควบ<wbr>คุม<wbr>โดย<wbr>ใช้<wbr>ไนโตรเจน<wbr>เหลว สามารถ<wbr>เก็บ<wbr>ไว้<wbr>ได้<wbr>เป็น<wbr>เวลา<wbr>นาน และ<wbr>เมื่อ<wbr>นำ<wbr>มา<wbr>บังคับ<wbr>ให้<wbr>เกิด<wbr>ต้น ต้น<wbr>ที่<wbr>ได้<wbr>ไม่<wbr>มี<wbr>การก<wb r="">ลาย<wbr>พันธุ์ หรือ<wbr>การ<wbr>เก็บ<wbr>รวบ<wbr>รวม<wbr>พันธุ์<wbr>พืช<wbr>โดย<wbr>บังคับ<wbr>ให้<wbr>พืช<wbr>โต<wbr>ช้า ๆ ใน<wbr>ขวด (minimal growth) การ<wbr>อนุรักษ์<wbr>เชื้อ<wbr>พันธุ์<wbr>พืช<wbr>ใน<wbr>ขวด<wbr>นี้<wbr>ใช้<wbr>พื้น<wbr>ที่<wbr>น้อย นอก<wbr>จาก<wbr>จะ<wbr>อยู่<wbr>ใน<wbr>สภาพ<wbr>ปลอด<wbr>เชื้อ<wbr>แล้ว ยัง<wbr>ปลอด<wbr>จาก<wbr>ภัย<wbr>ธรรม<wbr>ชาติ<wbr>อีก<wbr>ด้วย<wbr> ใน<wbr>ประเทศ<wbr>ไทย<wbr>ได้<wbr>มี<wbr>การ<wbr>วิจัย<wbr>รวบ<wbr>รวม<wbr>พันธุ์<wbr>ส้ม<wbr>ไผ่ มัน<wbr>สำปะหลัง <a href="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/nk1p8k30.htm">กล้วย<wbr><wbr></a> พืช<wbr>ตระกูล<wbr>ขิง และ<wbr><wbr> พืช<wbr>สมุน<wbr>ไพร<wbr>ไว้<wbr>ใน<wbr>ขวด <br clear="all" /><img align="left" hspace="10" src="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/pt145.gif" vspace="10" /> <br />
๓. การ<wbr>แลก<wbr>เปลี่ยน<wbr>พันธุ์<wbr>พืชกับต่าง<wbr>ประเทศ (International transfer)<wbr> การ<wbr>แลก<wbr>เปลี่ยน<wbr>พันธุ์<wbr>พืช<wbr>ใน<wbr>สภาพ<wbr>ที่<wbr>อยู่<wbr>ใน<wbr>ขวด สะดวก<wbr>กว่า<wbr>การ<wbr>ใช้<wbr>เมล็ด<wbr>หรือ<wbr>ส่วน<wbr>อื่น ๆ ของ<wbr>พืช เพราะ<wbr>พืช<wbr>ใน<wbr>ขวด<wbr>สะอาด<wbr>และ<wbr>ปราศ<wbr>จาก<wbr>เชื้อ<wbr> จุลินทรีย์<wbr>และ<wbr>รา<br />
๔. การ<wbr>ผลิต<wbr>สาร<wbr>ทุ<wbr>ติยภูมิ (Secondary metabolite)<wbr> การ<wbr>เพาะ<wbr>เลี้ยง<wbr>เนื้อ<wbr>เยื่อ<wbr>พืช<wbr>สมุน<wbr>ไพรต่าาง ๆ<wbr> แบบ<wbr>เซลล์<wbr>แขวน<wbr>ลอย (suspension culture) สามารถ<wbr>ผลิต<wbr>สาร<wbr>ต่าง ๆ ได้ เช่น ผลิต<wbr>สาร<wbr>ใช้<wbr>เป็น<wbr>ยา<wbr>ฆ่า<wbr>แมลง<wbr>ที่<wbr>ใช้<wbr>ทางด้ าน<wbr>การ<wbr>เกษตร ผลิต<wbr>ยา<wbr>รักษา<wbr>โรค<wbr>ใช้<wbr>ทางด้าน<wbr>การ<wbr>แพทย์ และ<wbr>ผลิต<wbr>สาร<wbr>ที่<wbr>ทำ<wbr>ให้<wbr>กุ้ง<wbr>ลอก<wbr>คราบ<wbr>ที่<wbr>ใช้<wbr>ทางการ<wbr>ประมง<br clear="all" /><img align="left" hspace="10" src="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/pt142.gif" vspace="10" /><br />
๕. การ<wbr>ปรับ<wbr>ปรุง<wbr>พันธุ์<wbr>พืช (Plant provement)<wbr> ประ<wbr>โยชน์<wbr>มหาศาล<wbr>ที่<wbr>ได้<wbr>จาก<wbr>การ<wbr>เพาะ<wbr>เลี้ยง<wbr>เนื้อ<wbr>เยื่อ<wbr>พืช คือ การ<wbr>ปรับ<wbr>ปรุง<wbr>พันธุ์<wbr>พืช สามารถ<wbr>สร้าง<wbr>พันธุ์<wbr>พืช<wbr>ต่าง ๆ ได้<wbr>ตาม<wbr>ความ<wbr>ประสงค์ ซึ่ง<wbr>มี<wbr>หลายวิธี<wbr>การ <br />
<dd>๕.๑ การ<wbr>เพาะ<wbr>เลี้ยง<wbr>เอมบริ<wbr>โอ<wbr>หรือคัพภุ (embryoculture) สามารถ<wbr>ช่วย<wbr>ชีวิต<wbr>พืช<wbr>พันธุ์<wbr>ต่าง ๆ ให้<wbr>รอด<wbr>ชีวิต (embryo rescue) พืช<wbr>บาง<wbr>ชนิด<wbr>ถ้า<wbr>ปล่อย<wbr>เอมบริ<wbr>โอ<wbr>ให้<wbr>เจริญ<wbr>อยู่<wbr>ภาย<wbr>ใน<wbr>เมล็ด<wbr>ตาม<wbr>ธรรม<wbr>ชาติ อาจ<wbr>ตาย<wbr>ได้ เนื่อง<wbr>จาก<wbr>ไม่<wbr>มี<wbr>อาหาร<wbr>สะ<wbr>สม<wbr>ใน<wbr>เมล็ด เช่น กล้วย<wbr>ไม้ หรือ<wbr>บาง<wbr>ชนิด<wbr>มี<wbr>อาหาร<wbr>สะ<wbr>สมอ<wbr>ยู่<wbr>ก็<wbr>จริง แต่<wbr>ไม่<w br="">สามารถ<wbr>นำ<wbr>ไป<wbr>ใช้<wbr>ได้ เช่น มะพร้าว<wbr>กะทิ ซึ่ง<wbr>ตาม<wbr>ปกติ<wbr>จะ<wbr>ไม่<wbr>งอก<wbr>ใน<wbr>ธรรม<wbr>ชาติ<wbr>หรือ<wbr>การ<wbr>ตาย<wbr>ของ<wbr>แอมบริ<wbr>โอ เนื่อง<wbr>จาก<wbr>เกิด imcompatibility ระหว่าง<wbr>เอมบริ<wbr>โอกับอาหาร<wbr>สะ<wbr>สม<wbr>ที่<wbr>อยู่<wbr>ใน endosperm ปัจจุบัน<wbr>สามารถ<wbr>ผลิต<wbr>ลูก<wbr>ผสม<wbr>ระหว่าง apple กับ pear ได้<wbr>เป็น appear ลูก<wbr>ผสม<wbr>ระหว่าง<wbr>ผัก<wbr>กาด<wbr>ขาว (Chinese cabbage) กับ กะหล่ำ<wbr>ปลี (cabbage) ได้<wbr>เป็น<wbr>ผัก<wbr>กาด<wbr>กะหล่ำ (hakuran) ลูก<wbr>ผสม<wbr>ไม้<wbr>ดอก<wbr>ต่าง ๆ เช่น สร้อย<wbr>ทอง (solidago) กับแอสเตอร์ (aster) ได้<wbr>เป็น solidaster ลูก<wbr>ผสม ไม้<wbr>ดอก<wbr>ประเภท<wbr>หัว เช่น <a href="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/nk1p8k27.htm">ว่าน<wbr>สี่<wbr>ทิศ<wbr><wbr></a> (amaryllis) กับเนอ<wbr>รีน (nerine) ได้<wbr>เป็น amarine กับ<wbr><a href="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/nk1p8k33.htm">พลับพลึง<wbr><wbr></a> (crinum) ได้<wbr>เป็น amacrinum ซึ่ง<wbr>ลูก<wbr>ผสม<wbr>ของ<wbr>พันธุ์<wbr>พืช<wbr> ใหม่ ๆ เหล่า<wbr>นี้ ทำ<wbr>ได้<wbr>โดย<wbr>การ<wbr>ผสม<wbr>เกสร<wbr>ข้าม<wbr>พันธุ์<wbr>หรือ<wbr>ข้าม<wbr>ชนิด เมื่อ<wbr>เกิด<wbr>การ<wbr>ปฏิสนธิ<wbr>ได้<wbr>เอมบริ<wbr>โอ<wbr>แล้ว จึง<wbr>ทำ<wbr>การ<wbr>แยก<wbr>เอมบริ<wbr>โอ<wbr>มา<wbr>เลี้ยง<wbr>ด้วย<w br="">อาหาร<wbr>วิทยา<wbr>ศาสตร์ เพื่อ<wbr>ช่วย<wbr>ให้<wbr>ลูก<wbr>ผสม<wbr>รอด<wbr>ชีวิต เป็น<wbr>การ<wbr>พัฒนา<wbr>พันธุ์<wbr>พืช<wbr>ใหม่ ๆ นอก<wbr>จาก<wbr>นี้ ยัง<wbr>เป็น<wbr>การ<wbr>ย่น<wbr>ระยะ<wbr>เวลา<wbr>ใน<wbr>การ<wbr>ปรับ<wbr>ปรุง<wbr>พันธุ์<wbr> ได้<wbr>อีก<wbr>ด้วย<br clear="all" /><img align="left" hspace="10" src="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/pt143.gif" vspace="10" /></dd><dd>๕.๒ การ<wbr>เพาะ<wbr>เลี้ยง<wbr>อับ<wbr>ละออง<wbr>เกสร และ<wbr>ละออง<wbr>เกสร<wbr>ของ<wbr>พืช (anther และ pollen culture) ใน<wbr>อาหาร<wbr>สังเคราะห์<wbr>จะ<wbr>ได้<wbr>เป็น<wbr>ต้น<wbr>พืช<wbr>ที่<wbr>มี<wbr>โครโมโซม เพียง<wbr>ชุด<wbr>เดียว (haploid plant) ซึ่ง<wbr>สามารถ<wbr>เพิ่ม<wbr>โครโมโซม<wbr>ได้<wbr>เป็น 2 ชุด (homozygous diploid) ซึ่ง<wbr>เป็น<wbr>พันธุ์<wbr>แท้ โดย<wbr>ใช้<wbr>สาร<wbr>พวก<wbr>โคลชิ<wbr>ซีน (colchicine) ปกติ<wbr>แล้ว<wbr>การ<wbr>ทำ<wbr>พืช<wbr>พันธุ์<wbr>แท้ ทำ<wbr>ได้<wbr>โดย<wbr>ผสม<wbr>ตัว<wbr>เอง<wbr>ซ้ำ<wbr>หลาย ๆ ชั่ว<wbr>อายุ (generations) ซึ่ง<wbr>ใช้<wbr>เวลา<wbr>นาน<wbr>ประมาณ ๖-๗ ปี แต่<wbr>โดย<wbr>วิธี<wbr>การ<wbr>นี้<wbr>สามารถ<wbr>ลด<wbr>เวลา<wbr>ใน<wbr>การ<wbr>สร้าง<wbr>พันธุ์<wbr>แท้<wbr>ได้ โดย<wbr>ใช้<wbr>เวลา<wbr>เพียง ๑-๒ ปี ตัว<wbr>อย่าง<wbr>พืช<wbr>พันธุ์<wbr>แท้<wbr>ที่<wbr>สามารถ<wbr>สร้าง<wbr>ได้<wbr>โดย<wbr>ใช้<wbr>วิธี<wbr>การ<wbr>นี้<wbr>ได้<wbr>สำเร็จ ได้<wbr>แก่ ข้าว ข้าวโพด เบญจมาศ เยอบีรา ลิลลี่ พริก มะเขือ สตรอเบอ<wbr>รี่ เป็น<wbr>ต้น ปกติ<wbr>แล้ว<wbr>การ<wbr>สร้าง<wbr>พืช<wbr>พันธุ์<wbr>แท้ เพื่อ<wbr>ให้<wbr>ได้<wbr>ต้น<wbr>พันธุ์<wbr>ที่<wbr>มี<wbr>คุณสมบัติ<wbr>ต่าง ๆ กัน เช่น ทน<wbr>เค็ม ทน<wbr>แล้ง ทน<wbr>ร้อน ทน<wbr>ยา<wbr>ฆ่า<wbr>วัช<wbr>พืช ทน<wbr>โรค ก็<wbr>สามารถ<wbr>คัด<wbr>พันธุ์<wbr>ได้<wbr>ใน<wbr>หลอด<wbr>ทด<wbr>ลอง โดย<wbr>การ<wbr>ปรับ<wbr>สภาพ<wbr>อาหาร<wbr>ที่<wbr>ใช้<wbr>เลี้ยง หรือ<wbr>สิ่ง<wbr>แวด<wbr>ล้อม<wbr>ที่<wbr>เลี้ยง<wbr>ได้<wbr>ตาม<wbr>จุด<wbr>ประสงค์ ก็<wbr>สามารถ<wbr>สร้าง<wbr>พืช<wbr>ที่<wbr>ทน<wbr>ต่อ stress ต่าง ๆ ได้ เช่น ข้าว<wbr>ทน<wbr>เค็ม ข้าว<wbr>ทน<wbr>ต่อ<wbr>ยา<wbr>ฆ่า วัช<wbr>พืช เป็น<wbr>ต้น<br />
<img align="left" hspace="10" src="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/pt141.gif" vspace="10" /></dd><dd>๕.๓การ<wbr>ชัก<wbr>นำ<wbr>ให้<wbr>พืช<wbr>กลาย<wbr>พันธุ์<wbr>เป็น<wbr>พันธุ์<wbr>ใหม่ ๆ <wbr>(induced mutation) สามารถ<wbr>ทำ<wbr>ได้ ซึ่ง<wbr>ปกติ<wbr>แล้ว<wbr>การ<wbr>เพาะ<wbr>เลี้ยง<wbr>เนื้อ<wbr>เยื่อ โดย<wbr>ผ่าน<wbr>แคลลัสเลี้ยง<wbr>ไป<wbr>เรื่อย ๆ<wbr>เป็น<wbr>เวลา<wbr>หลาย ๆ ปี ก็<wbr>เป็น<wbr>สาเหตุ<wbr>ทำ<wbr>ให้<wbr>เกิด<wbr>การก<wbr>ลาย<wbr>พันธุ์<wbr>ได้ ที่<wbr>เรียก<wbr>ว่า somaclonal variation การ<wbr>กลาย<wbr>พันธุ์<wbr>เกิด<wbr>จาก<wbr>การ<wbr>เพิ่ม<wbr>หรือ<wbr>การ<wbr>ขาด<wbr>หาย<wbr>ไปของ<wbr>โครโมโซม หรือ<wbr>ยีนส์ที่<wbr>ควบ<wbr>คุม<wbr>ลักษณะ<wbr>ทา<wbr>งกรรม<wbr>พันธุ์ ถ้า<wbr>ต้อง<wbr>การ<wbr>ต้น<wbr>กลาย<wbr>พันธุ์<wbr>ใน<wbr>ปริมาณ<wbr>ที่<wbr>มาก<wbr>ขึ้น ก็<wbr>สามารถ<wbr>นำ<wbr>ไป treat ด้วย<wbr>สาร<wbr>เคมี<wbr>ที่<wbr>เรียก<wbr>ว่า chemical mutagen ได้<wbr>แก่ EMS (ethyl methane sulfonate) <wbr>หรือ<wbr>นำ<wbr>ไป<wbr>ฉาย<wbr>รังสี (irradiation) เช่น รังสี<wbr>แกมมา (gamma-ray) เป็น<wbr>วิธี<wbr>การ<wbr>สร้าง<wbr>พืช<wbr>พันธุ์<wbr>ใหม่ ๆ ขึ้น<wbr>มา<wbr>ได้ นอก<wbr>เหนือ<wbr>จาก<wbr>วิธี<wbr>การ<wbr>ดั้งเดิม คือ การ<wbr>ผสม<wbr>เกสร<wbr>ให้<wbr>ติด<wbr>เมล็ด โดย<wbr>ขบวน<wbr>การ pollination fertilization และ seed production ซึ่ง<wbr>เป็น<wbr>วิธี<wbr>การ<wbr>ง่าย ๆ ที่<wbr>เกษตร<wbr>กร<wbr>รู้<wbr>จัก<wbr>กัน<wbr>ดี<wbr>อยู่<wbr> แล้ว<wbr><br clear="all" /><img align="left" hspace="10" src="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/pt144.gif" vspace="10" /><br />
โครง<wbr>การ<wbr>วิจัย<wbr>และ<wbr>พัฒนา<wbr>การ<wbr>เพาะ<wbr>เลี้ยง<wbr>เนื้อ<wbr>เยื่อ<wbr>พืช ภาค<wbr>วิชา<wbr>พืช<wbr>สวน คณะ<wbr>เกษตร มหาวิทยาลัย<wbr>เกษตร<wbr>ศาสตร์ สามารถ<wbr>สร้าง<wbr>พันธุ์<wbr>พืช<wbr>ใหม่ ๆ ได้<wbr>หลาย<wbr>ชนิด โดย<wbr>การ<wbr>ชัก<wbr>นำ<wbr>ให้<wbr>กลาย<wbr>พันธุ์ โดย<wbr>ใช้<wbr>รังสีแกมมา กับต้น<wbr>พันธุ์<wbr>พืช<wbr>ใน<wbr>ขณะ<wbr>เลี้ยง<wbr>อยู่<wbr>ใน<wbr>หลอด<wbr>ทด<wbr>ลอง ได้<wbr>แก่<wbr><wbr><a href="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/nk1p8k25.htm">คาร์เนชั่น<wbr></a> เบญจมาศ เก็กฮวย และกล้วย เป็น<wbr>ต้น ซึ่ง<wbr>พันธุ์<wbr>ใหม่ ๆ ที่<wbr>เกิด<wbr>ขึ้น<wbr>นี้<wbr>แตก<wbr>ต่าง<wbr>ไป<wbr>จาก<wbr>พันธุ์เดิม ใน<wbr>เรื่อง<wbr>ของ<wbr>ลักษณะ ขนาด<wbr>ของ<wbr>ดอก ขนาด<wbr>ของ<wbr>ผล นอก<wbr>จาก<wbr>นี้<wbr>ใน<wbr>การ<wbr>ขยาย<wbr>พันธุ์<wbr>กล้วย<wbr>ไม้<wbr>เป็น<wbr>จำนวน<wbr>มาก โดย<wbr>วิธี<wbr>เพาะ<wbr>เลี้ยง<wbr>เนื้อ<wbr>เยื่อ ก็<wbr>พบ<wbr>ว่า<wbr>เกิด<wbr>การก<wbr>ลาย<wbr>พันธุ์<wbr>ขึ้น<wbr>เอง (spontaneous mutation) ได้<wbr>พันธุ์<wbr>ใหม่ ๆ มาก<wbr>มาย แตก<wbr>ต่าง<wbr>จาก<wbr>พันธุ์เดิม ใน<wbr>เรื่อง<wbr>ของ <wbr>ขนาดของ<wbr>ดอก และ<wbr>สี<wbr>ดอก<wbr>เปลี่ยน<wbr>แปลง<wbr>ไป<wbr>จาก<wbr>ของเดิม สำหรับ<wbr>การ<wbr>วิจัย<wbr>ใน<wbr>เรื่อง<wbr>ขิง<wbr>นั้น ก็<wbr>สามารถ<wbr>พัฒนา<wbr>พันธุ์<wbr>ขิง<wbr>ต้น tetraploid จาก<wbr>ต้น diploid โดย<wbr>การ<wbr>ใช้<wbr>โคลชิ<wbr>ซีนร่วมกับเทคนิค<wbr>การ<wbr>เพาะ<wbr>เลี้ยง<wbr>เนื้อ<wbr>เยื่อ<wbr><wbr><br clear="all" /><img align="left" hspace="10" src="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/pt139.gif" vspace="10" /><br />
ใน<wbr>ปัจจุบัน<wbr>นี้ เทคโนโลยี<wbr>ชีวภาพ<wbr>ชั้น<wbr>สูง ที่<wbr>นัก<wbr>วิจัย<wbr>ใน<wbr>ต่าง<wbr>ประเทศ<wbr>สร้าง<wbr>พืช<wbr>พันธุ์<wbr>ใหม่ ๆ ขึ้น ก็<wbr>โดย<wbr>วิธี<wbr>การ<wbr>รวม<wbr>โปรโตพลาสต์ (protoplast fusion) เป็น<wbr>การ<wbr> รวม<wbr>ของ<wbr>เซลล์<wbr>โซ<wbr>มา<wbr>ติก (somatic cell) จึง<wbr>เรียก<wbr>ว่า<wbr>เป็น<wbr>การ<wbr>ทำ somatic hybridization ซึ่ง<wbr>แตก<wbr>ต่าง<wbr>จาก zygotic hybridization ที่<wbr>จะ<wbr>สามารถ<wbr>บังคับ<wbr>ให้<wbr>พืช<wbr>ต่าง<wbr>ชนิด ต่าง<wbr> สกุล ต่าง<wbr>หมู่ ต่าง<wbr>เหล่า ผสม<wbr>กัน<wbr>ได้ โดย<wbr>ใช้<wbr>สาร<wbr>เคมี ได้<wbr>แก่ PEG (polyethylene glycol) หรือ<wbr>แคลเซียม<wbr>คลอ<wbr>ไรด์ (calcium choride) หรือ<wbr>ใช้<wbr>กระแส<wbr>ไฟ<wbr>ฟ้า<wbr>เป็น<wbr>ตัว<wbr>กระตุ้น ปัจจุบัน<wbr>ก็ ็<wbr>มี<wbr>ลูก<wbr>ผสม<wbr>มาก<wbr>มาย<wbr>เป็น<wbr>พืช<wbr>พันธุ์<wbr>ใหม่ เช่น pomato ซึ่ง<wbr>เป็น<wbr>ลูก<wbr>ผสม<wbr>ระหว่าง<wbr><wbr><a href="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/nk1p8k29.htm">มัน<wbr>ฝรั่ง<wbr><wbr></a> (potato) และ<wbr>มะเขือ<wbr>เทศ (tomato) พืช<wbr>ต้น<wbr>นี้<wbr>ให้<wbr>ผล<wbr>คล้าย<wbr>มะเขือ<wbr>เทศ<wbr>ตามกิ่งก้าน และ<wbr>ให้<wbr>หัว<wbr>คล้าย<wbr>มัน<wbr>ฝรั่ง<wbr>ที่<wbr>ราก<wbr>อีก<wbr>ด้วย<wbr><wbr><br />
<img align="left" hspace="20" src="http://web.ku.ac.th/nk40/nk/data/08/pt140.gif" vspace="10" /><br />
นอก<wbr>จาก<wbr>การ<wbr>วิจัย<wbr>ทางด้าน<wbr>การ<wbr>รวม<wbr>โปรโตพลาสต์ ทำ<wbr>ให้<wbr>เกิด<wbr>เป็น<wbr>พืช<wbr>พันธุ์<wbr>ใหม่<wbr>แล้ว ใน<wbr>ต่าง<wbr>ประเทศ<wbr>ยัง<wbr>มี<wbr>การ<wbr>ศึกษา<wbr>เกี่ยวกับการ<wbr>ถ่าย<wbr>ทอด<wbr>ลักษณะ<wbr>ทา<wbr>งกรรม<wbr>พันธุ์ โดย<wbr>สามารถ<wbr>แยก<wbr>เอา<wbr>นิวเคลียส <wbr>(nucleus) จาก<wbr>เซลล์ หรือ<wbr>แยก<wbr>กรด<wbr>นิวคลีอิก (nucleic acid) หรือ<wbr>แม้<wbr>กระทั่ง organelle เล็ก ๆ ใน<wbr>เซลล์ ได้<wbr>แก่ พลาสมิด (plasmid) ไมโต<wbr>คอนเดรีย (mitochondria) หรือ DNA จาก<wbr>พืช RNA จาก<wbr>แบคทีเรีย เข้า<wbr>ไป<wbr>ใน<wbr>โปรโตพลาสต์ของ<wbr>พืช<wbr>เศรษฐกิจ และ<wbr>ยัง<wbr>ทำ<wbr>ให้<wbr>เกิด<wbr>เป็น<wbr>พืช<wbr>พันธุ์<wbr>ที่<wbr>พึง<wbr>ประสงค์<wbr>ได้ใน<wbr>ต่าง<wbr>ประเทศ<wbr>ได้<wbr>ทำ<wbr>การ<wbr>วิจัย<wbr>กัน<wbr>อย่าง<wbr>จริง<wbr>จัง สามารถ<wbr>ผลิต<wbr>พันธุ์<wbr>ใหม่ ๆ ได้<wbr>มาก<wbr>มาย<wbr>หลาย<wbr>ชนิด ได้<wbr>แก่ sunbean (sunflower + bean) ซึ่ง<wbr>เกิด<wbr>จาก<wbr>การ<wbr>ตัด<wbr>เอา<wbr>ส่วน<wbr>หนึ่ง<wbr>ของ<wbr>ยีนส์จาก<wbr>ต้น<wbr>ถั่ว เข้า<wbr>ไป<wbr>ต่อกับยีนส์ของ<wbr>ทาน<wbr>ตะวันลูกผสม<wbr> sunbean นี้<wbr>มี<wbr>ลักษณะ<wbr>ของ<wbr>ต้น<wbr>ถั่ว<wbr>และ<wbr>ทาน<wbr>ตะวัน<wbr>รวม<wbr>กัน และ<wbr>ใน<wbr>ชีวิต<wbr>ของ<wbr>เรา<wbr>นี้<wbr>ก็<wbr>คง<wbr>จะ<wbr>มี<wbr>พืช<wbr>พันธุ์<wbr>ใหม่ ๆ <wbr>เกิด<wbr>ขึ้น<wbr>อีก<wbr>มาก<wbr>มาย<wbr>โดย<wbr>ใช้<wbr>เทคนิค<wbr>ทางพันธุ<wbr>วิศวกรรม (genetic engineering) หรือ recombinant DNA หรือ DNA technology ซึ่ง<wbr>บาง<wbr>อย่าง<wbr>ก็<wbr>อาจ<wbr>จะ<wbr>ได้<wbr>ทั้ง<wbr>ประ<wbr>โยชน์<wbr>และ<wbr>โทษ<wbr> จึง<wbr>ควร<wbr>พิจารณา<wbr>ให้<wbr>ดี<wbr>ว่า<wbr>สม<wbr>ควร<wbr>จะ<wbr>นำ<wbr>เทคโนโลยี<wbr>เหล่า<wbr>นี้<wbr>ไป<wbr>ใช้<wbr>ใน<wbr>ขอบ<wbr>เขต<wbr>แค่<wbr>ไหน และ<wbr>อย่าง<wbr>ไร </dd>การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อhttp://www.blogger.com/profile/10114522774018173432noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-3887584004274869452.post-20982875765916498072011-08-03T00:44:00.000-07:002011-08-03T00:44:49.862-07:00กล้วยไม้ หรือ เอื้อง เป็นพืชดอกที่มีความหลากหลายมากที่สุดกลุ่มหนึ่ง โดยมีประมาณ 880 สกุล และประมาณ 22,000 ชนิดที่มีการยอมรับ(อาจมากกว่า 25,000 ชนิด)[1] คิดเป็น 6–11% ของพืชมีเมล็ด[2] มีการค้นพบราวๆ 800 ชนิดทุกๆปี มีสกุลใหญ่ๆคือ Bulbophyllum (2,000 ชนิด), Epidendrum (1,500 ชนิด), Dendrobium (1,400 ชนิด) และ Pleurothallis (1,000 ชนิด) สายพันธุ์ของกล้วยไม้ที่ขึ้นและเติบโตในป่าเรียกว่า กล้วยไม้ป่า<br />
<br />
กล้วยไม้จัดอยู่ในกลุ่มพืชใบเลี้ยงเดี่ยว อยู่ในวงศ์กล้วยไม้ มีลักษณะการเติบโตแบบต่างๆ ได้แก่<br />
<br />
- กล้วยไม้อากาศ คือ กล้วยไม้ที่เกาะอาศัยอยู่บนต้นไม้อื่น โดยมีรากเกาะอยู่กับกิ่งไม้หรือลำต้น <br />
<br />
- กล้วยไม้ดิน คือ กล้วยไม้ที่ขึ้นอยู่ตามพื้นดินที่ปกคลุมด้วยอินทรีย์วัตถุ <br />
<br />
- กล้วยไม้หิน คือ กล้วยไม้ที่ขึ้นตามโขดหิน<br />
<br />
<strong>การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อกล้วยไม้</strong> <br />
<br />
การเพาะเนื้อเยื่อกล้วยไม้หรือที่เรียกกันว่า "การปั่นตา" เป็นการขยายพันธุ์กล้วยไม้ที่ทำให้ได้ต้นที่มีลักษณะพันธุ์เหมือนเดิมเป็นปริมาณมากในเวลาอันรวดเร็ว โดยการนำเนื้อเยื่อจากส่วนต่างๆ ของกล้วยไม้ เช่น ตายอด ตาข้าง ปลายใบอ่อน มาเลี้ยงด้วยอาหารสังเคราะห์ ในสภาพปลอดเชื้อและมีการควบคุมสภาพแวดล้อม เช่น แสง อุณหภูมิให้เหมาะสมกับการเจริญเติบโตต้นที่ได้จากการขยายพันธุ์วิธีนี้อาจมีโอกาสกลายพันธุ์ไปในทางที่ดีขึ้นหรือเลวลงแต่ก็พบได้ยาก<br />
<br />
<strong>การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อกล้วยไม้</strong> <br />
<br />
ระยะเวลาในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อตั้งแต่เริ่มต้นจนถึงนำไปปลูกได้ต้องใช้เวลาอย่างน้อยประมาณ 10 เดือน แต่ส่วนใหญ่จะใช้เวลานานกว่านี้ ขึ้นอยู่กับชนิดของกล้วยไม้ ความสมบูรณ์ของหน่อ เทคนิคในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ สูตรอาหารสังเคราะห์ และสภาพแวดล้อม<br />
<br />
<strong>ขั้นตอนสำคัญในการเพาะเนื้อเยื่อกล้วยไม้ พอสรุปได้ดังนี้</strong><br />
เลือกชิ้นส่วนของกล้วยไม้ที่มีเนื้อเยื่อเจริญที่สามารถพัฒนาเป็นต้นอ่อนได้ เช่น กล้วยไม้สกุลหวายใช้หน่ออ่อน ตาข้าง ตายอด ดอกอ่อน กล้วยไม้คัทลียาใช้หน่ออ่อน ตาข้าง ตายอด ปลายใบอ่อน กล้วยไม้สกุลแวนด้าและลูกผสมใช้ยอดอ่อนที่มีตาข้างและตายอด ช่อดอกอ่อน เป็นต้น<br />
<br />
ฟอกฆ่าเชื้อที่ผิวชิ้นส่วนกล้วยไม้ให้ปลอดเชื้อจุลินทรีย์ก่อนตัดส่วนเยื่อเจริญออกไปเพาะเลี้ยง การเลี้ยงชิ้นส่วนหรือตาในระยะแรก เมื่อฟอกฆ่าเชื้อแล้วใช้มีดเจาะตาขนาดเล็กไม่เกิน 0.5 เซนติเมตร<br />
<br />
นำไปเลี้ยงในอาหารเหลวหรืออาหารแข็งสูตรที่เหมาะสม ตาจะมีโปรโตคอร์ม (protocorm) สีเขียวแตกออกมารอบๆระยะนี้ต้องเปลี่ยนอาหารทุกสองสัปดาห์ การเพิ่มจำนวนโปรโตคอร์มโดยคัดเลือกโปรโตคอร์มที่เป็นก้อนกลมไม่มีใบยอด ไปเลี้ยงในอาหารสูตรที่เหมาะสมเพื่อเพิ่มจำนวนโปรโตคอร์ม<br />
<br />
ถ้าโปรโตคอร์มพัฒนาเป็นยอดต้องตัดยอดทิ้งเพื่อให้เกิดการแตกโปรโตคอร์ม การเลี้ยงโปรโตคอร์มให้เป็นต้น<br />
<br />
เมื่อได้จำนวนโปรโตคอร์มตามต้องการแล้ว ย้ายไปเลี้ยงในอาหารแข็งสูตรที่เหมาะสมให้โปรโตคอร์มแต่ละหน่วยเจริญเติบโตเป็นต้นกล้ามีใบยอดและราก เมื่อต้นสูงประมาณ 2-3 เซนติเมตร ก็คัดแยกแต่ละต้นย้ายไปเลี้ยงในวุ้นอาหารสูตรถ่ายขวดประมาณ 50 ต้นต่อขวด เพื่อให้เจริญเติบโตแข็งแรง พร้อมที่จะนำออกปลูกภายนอกได้<span style="color: teal;"><strong>การเพาะเนื้อเยื่อกล้วยไม้หรือที่เรียกกันว่า "การปั่นตา"<br />
เป็นการขยายพันธุ์กล้วยไม้ที่ทำให้ได้ต้นที่มีลักษณะพันธุ์เหมือนเดิมเป็นปริมาณมากในเวลาอันรวดเร็ว<br />
โดยการนำเนื้อเยื่อจากส่วนต่างๆ ของกล้วยไม้ เช่น ตายอด ตาข้าง ปลายใบอ่อน มาเลี้ยงด้วยอาหารสังเคราะห์<br />
ในสภาพปลอดเชื้อและมีการควบคุมสภาพแวดล้อม เช่น แสง อุณหภูมิ<br />
ให้เหมาะสมกับการเจริญเติบโตต้นที่ได้จากการขยายพันธุ์วิธีนี้อาจมีโอกาสกลายพันธุ์ไปในทางที่ดีขึ้นหรือเ<br />
ลวลงแต่ก็พบได้ยาก<br />
ระยะเวลาในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อตั้งแต่เริ่มต้นจนถึงนำไปปลูกได้ต้องใช้เวลาอย่างน้อยประมาณ 10 เดือน<br />
แต่ส่วนใหญ่จะใช้เวลานานกว่านี้ ขึ้นอยู่กับชนิดของกล้วยไม้ ความสมบูรณ์ของหน่อ<br />
เทคนิคในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ สูตรอาหารสังเคราะห์ และสภาพแวดล้อม<br />
ขั้นตอนสำคัญในการเพาะเนื้อเยื่อกล้วยไม้ พอสรุปได้ดังนี้<br />
เลือกชิ้นส่วนของกล้วยไม้ที่มีเนื้อเยื่อเจริญที่สามารถพัฒนาเป็นต้นอ่อนได้ เช่น<br />
กล้วยไม้สกุลหวายใช้หน่ออ่อน ตาข้าง ตายอด ดอกอ่อน กล้วยไม้คัทลียาใช้หน่ออ่อน ตาข้าง ตายอด ปลายใบอ่อน<br />
กล้วยไม้สกุลแวนด้าและลูกผสมใช้ยอดอ่อนที่มีตาข้างและตายอด ช่อดอกอ่อน เป็นต้น<br />
<br />
ฟอกฆ่าเชื้อที่ผิวชิ้นส่วนกล้วยไม้ให้ปลอดเชื้อจุลินทรีย์ก่อนตัดส่วนเยื่อเจริญออกไปเพาะเลี้ยง<br />
การเลี้ยงชิ้นส่วนหรือตาในระยะแรก เมื่อฟอกฆ่าเชื้อแล้วใช้มีดเจาะตาขนาดเล็กไม่เกิน 0.5 เซนติเมตร<br />
<br />
นำไปเลี้ยงในอาหารเหลวหรืออาหารแข็งสูตรที่เหมาะสม ตาจะมีโปรโตคอร์ม (protocorm) สีเขียวแตกออกมารอบๆระยะนี้ต้องเปลี่ยนอาหารทุกสองสัปดาห์ การเพิ่มจำนวนโปรโตคอร์มโดยคัดเลือกโปรโตคอร์มที่เป็นก้อนกลมไม่มีใบยอด ไปเลี้ยงในอาหารสูตรที่เหมาะสมเพื่อเพิ่มจำนวนโปรโตคอร์ม<br />
<br />
ถ้าโปรโตคอร์มพัฒนาเป็นยอดต้องตัดยอดทิ้งเพื่อให้เกิดการแตกโปรโตคอร์ม การเลี้ยงโปรโตคอร์มให้เป็นต้น<br />
<img border="0" height="450" src="http://natres.psu.ac.th/Department/PlantScience/510-111web/lecture/chapter9/img018.GIF" usemap="#Objmap" width="600" /></strong></span><span style="color: black;"> +++++++ประโยชน์การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืช+++++++<br />
ปัจจุบันนี้การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชมีบทบาทอย่างมากทั้งในด้านการเกษตรกรรม อุตสาหกรรม และด้านการแพทย์ ด้วยเหตุนี้จึงขอกล่าวถึงประโยชน์ของการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชเป็นข้อ ๆ ดังนี้<br />
เพื่อการขยายพันธุ์<br />
โดยอาศัยอาหารสูตรที่สามารถเพิ่มจำนวนต้นเป็นทวีคูณจากไดอะแกรมประกอบ จะเห็นว่าจากที่เราเริ่มต้นทำการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อต้นพืชเพียงต้นเดียว และทำการย้ายเนื้อเยื่อเดือนละครั้ง และแต่ละเดือนต้นพืชสามารถเพิ่มจำนวนต้นได้ 10 ต้น เมื่อเวลาผ่านไปเพียง 6 เดือน เราสามารถผลิตต้นพืชในหลอดทดลองได้ถึง 1 ล้านต้น ซึ่งไม่มีวิธีอื่นใดที่จะ ผลิตต้นกล้าพืชให้ได้ปริมาณมากและรวดเร็วเช่นนี้<br />
เพื่อการปรับปรุงพันธุ์<br />
ในการเลี้ยงเนื้อเยื่อพืช สามารถคัดเลือกสายพันธุ์พืช เพื่อการผลิตพืชพันธุ์ต้านทาน (resistant plant) สามารถที่จะชักนำให้เกิดความต้านทานขึ้นในต้นพืช โดยการเพาะเลี้ยงในอาหารที่มีเงื่อนไขต่าง ๆ เช่น การสร้างพันธุ์ต้านทานต่อสารพิษของโรค ต้านทานต่อแมลง หรือต้านทานต่อยากำจัดวัชพืช เป็นต้น หรือเพื่อการผลิตพืชพันธุ์ทนทาน (tolerance plant) ในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชสามารถที่จะคัดสายพันธุ์ทนทานได้จากการจัด เงื่อนไขของอาหารและสภาวะแวดล้อม เช่น การคัดเลือกสายพันธุ์พืชทนเค็มจากการเลี้ยงเนื้อเยื่อในอาหารที่มีส่วนผสม ของเกลือ การคัดเลือกสายพันธุ์ทนต่อดินเปรี้ยวจากการเลี้ยงในอาหารที่มีสภาพเป็นกรด การคัดสายพันธุ์ที่ทนร้อนโดยการเพาะเลี้ยงในสภาพที่มีอุณหภูมิสูง เป็นต้น<br />
โดยการชักนำให้เกิดการกลายพันธุ์ แล้วคัดเลือกเอาสายพันธุ์ดีไว้ ซึ่งอาจทำได้โดยการใช้สารเคมี การฉายรังสี การตัดต่อยีนส์ (DNA ricombination) และการย้ายยีนส์ (gene transformation) ยังเปิดโอกาศให้สามารถใช้ประโยชน์ในการสร้างพืชสายพันธุ์ใหม่ (transgenic plants) ที่ต้องการในพืชบางชนิด<br />
เพื่อการผลิตพืชที่ปราศเชื้อไวรัส (Virus-free plant propagation)<br />
ปัญหาสำคัญประการหนึ่งของการผลิตพืช คือ โรค ซึ่งอาจมีสาเหตุมาจากเชื้อรา แบคทีเรีย หรือไวรัส ต้นพืชที่ผลิตได้จากการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อจะปราศจากเชื้อราและแบคทีเรีย เป็นอันดับแรก เพราะถ้าหากว่ามีอนุภาคของเชื้อเหล่านั้นตกลงไปในอาหารเลี้ยงเนื้อเยื่อ ก็จะแสดงอาการปนเปื้อนของเชื้อ (contamination) เพราะทั้งอนุภาคของแบคทีเรียและสปอร์ของราสามารถเจริญเติบโตได้อย่างรวด เร็วบนอาหารและจะปรากฎกลุ่ม colony ของจุลินทรีย์เหล่านั้น ที่สังเกตเห็นได้ด้วยตาเปล่า เราจึงสามารถเก็บออกมาขจัดทิ้งได้ ส่วนในกรณีของการปนเปื้อนของเชื้อไวรัส ซึ่งเป็นอนุภาคที่มีขนาดเล็กมาก และจะสามารถดำรงชีวิตอยู่ได้ก็ต่อเมื่ออาศัยอยู่ในเซลล์ชนิดอื่น ฉะนั้นต้นพืชที่มีการปนเปื้อนของเชื้อไวรัสจึงไม่แสดงอาการปนเปื้อนให้เห็น สามารถทราบได้ก็ต่อเมื่อเกิดอาการบนต้นพืช ดังนั้นก่อนทำการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อจะต้องคัดเลือกและตรวจสอบเนื้อเยื่อ ชิ้นส่วนของพืชที่นับว่ามีความปลอดจากเชื้อไวรัสมากที่สุด คือ apical meristem ซึ่งเป็นเนื้อเยื่อเจริญที่อยู่บริเวณปลายยอดของลำต้น และเนื้อเยื่อของคัพภะ (embryo) ที่อยู่ในเมล็ด อันเนื่องจากอนุภาคของไวรัสสามารถเคลื่อนย้ายได้ทางท่ออาหาร (phloem) และ ท่อน้ำ (xylem) แต่เนื้อเยื่อดังกล่าวไม่มีท่อน้ำและท่ออาหารที่จะติดต่อกับ ส่วนอื่น ๆ ของต้นพืช</span><br />
เพื่อการผลิตสารทุติยภูมิ (Secondary metabolite)<br />
พืชบางชนิดสามารถให้สารที่มีคุณสมบัติทางยา หรือมีประโยชน์ทางด้านอุตสาหกรรม แต่ในบางครั้งปริมาณเนื้อสารที่ต้องการมีอยู่ในปริมาณน้อยมาก จะต้องใช้ชิ้นส่วนพืชจำนวนมากนำมาสกัดแยก การเพาะเลี้ยงเซลล์หรือเนื้อเยื่อของพืชเหล่านั้น ในสภาพแวดล้อมและอาหารที่เหมาะสมก็อาจชักนำให้เกิดการสังเคราะห์สารที่เรา ต้องการได้มากขึ้น<br />
เพื่อการศึกษาทางชีวเคมีและสรีรวิทยาของพืช (Biochemical and Physiology study)<br />
ต้นพืชที่เลี้ยงในหลอดทดลองนั้นสามารถที่จะติดตามการพัฒนาและเปลี่ยนแปลงได้ง่ายและอย่างใกล้ชนิด เช่น การศึกษาการตอบสนองของเนื้อเยื่อพืชต่อยาฆ่าแมลง ยาปราบศัตรูพืช หรือต่อสารควบคุมการเจริญเติบโตของพืช และการควบคุมตัวแปรต่าง ๆ ในหลอดทดลองทำได้ง่ายได้กว่าแปลงทดลอง<br />
เพื่อการเก็บรักษาพันธุ์พืช (Germplasm conservation, gene bank)<br />
ปัจจุบันพืชพรรณหลายชนิดได้สูญพันธุ์ไปหรือกำลังจะสูญพันธุ์ไปอย่างน่าเป็นห่วง ซึ่งอาจมีสาเหตุมาจากการเปลี่ยนแปลงของสภาวะแวดล้อมหรือเกิดจากการทำลายของมนุษย์เอง ด้วยเหตุนี้นักเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชจึงได้พยายามคิดหาวิธีที่จะเก็บรักษาพืชพรรณต่าง ๆ ไว้ในหลอดทดลอง โดยการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อในอาหารที่มีส่วนผสมของสารชะลอการเจริญเติบโตบางชนิด หรือมีสารที่ทำให้เกิดความเครียดของน้ำขึ้นในหลอดทดลอง ทำให้พืชมีการเจริญเติบโตในอัตราที่ช้ามาก ๆ เพื่อเป็นการประหยัดแรงงาน เวลา และอาหารในการที่จะต้องทำการย้ายเนื้อเยื่อบ่อย ๆ จนกว่าเมื่อใดที่ต้องการจะเพิ่มปริมาณเนื้อเยื่อนั้นสามารถย้ายลงเลี้ยงในอาหารสูตรปกติของพืชชนิดนั้น ๆ อีกวิธีหนึ่งก็คือ การเก็บรักษาเนื้อเยื่อไว้ในไนโตรเจนเหลวที่ อุณหภูมิต่ำถึง -196 องศาเซลเซียส ในสภาพเช่นนี้เซลล์และเนื้อเยื่อจะคงสภาพและมีชีวิตอยู่ได้ยาวนาน…การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อhttp://www.blogger.com/profile/10114522774018173432noreply@blogger.com0